分光光度計計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計的基本工作原理
分光光度計的基本工作原理是基于物質(zhì)對光(對光的波長)的吸收具有選擇性,不同的物質(zhì)都有各自的吸收光帶,所以,當光色散后的光譜通過某一溶液時,其中某些波長的光線就會被溶液吸收。在一定的波長下,溶液中物質(zhì)的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關系,即符合比爾定律。
T=I/Iolg(Io/I)=εcb
式中,T為透過率,Io為入射光強度,I為透射光強度,A為消光值(吸光度),ε為吸收系數(shù),b為溶液的光徑長度,c為溶液的濃度。從以上公式可以看出,當入射光、吸收系數(shù)和溶液厚度一定時,透光率是根據(jù)溶液的濃度而變化的